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石蜡组织切片抗原双修复(胰酶+柠檬酸)方法

发布时间:2013-3-18 11:38:28

1、仪器设备:不锈钢压力锅(迈新产品编号:HPC-1001),耐高温塑料染色架(迈新产品编号:RAK-2001),电磁炉(120-2000W,可调节加热功率和时间),电热恒温干燥箱,孵育盒。 
2、所需试剂:柠檬酸抗原修复液(迈新产品编号:MVS-0100/0101或MVS-0066),胰酶抗原修复液(迈新产品编号:DIG-3008),蒸馏水,PBS缓冲液。 
3、操作步骤:   
⑴ 石蜡切片脱蜡、水化,自来水冲洗(建议除去自来水,在离组织3mm处用免疫组   化油笔(迈新产品编号:PEN-0002)画圈),PBS冲洗3×3分钟; 
⑵ 除去切片上的PBS,切片上滴加适量已配制成工作液的胰酶溶液,并将切片放入孵育盒孵育15分钟。PBS冲洗2×3分钟。自来水冲洗并浸泡于水中待用;
⑶ 取适量已稀释成工作液的柠檬酸抗原修复液(800-1500mL)于压力锅中,将压力锅放置于电磁炉上,大功率加热至沸腾; 
⑷ 将功率调至中度(800-1000W),将切片置于耐高温染色架上,放入已沸腾的修复液中,盖上锅盖,扣上压力阀,继续加热; 
⑸ 当压力阀开始喷气时计时1.5-2分钟,然后将压力锅离开电磁炉,室温自然冷却10分钟后,可用自来水在压力锅外壁冲淋加速锅内修复液冷却,冷却至室温后取出切片,自来水冲洗干净,PBS冲洗2×3分钟,之后按照迈新相关试剂盒的操作步骤执行。 
4、注意事项:详见石蜡组织切片抗原热修复方法和抗原酶消化修复方法注意事项。