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免疫细胞化学染色方法

发布时间:2017-4-25 14:25:27

1、细胞标本置于载玻片上;
2、固定:建议使用95%乙醇或10%中性缓冲福尔马林固定液固定10分钟;
3、稍水洗,载玻片上加1%Triton X-100试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
4、根据第一抗体的要求,对细胞进行相应的抗原修复;
5、如有必要,每张载玻片上加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
6、除去PBS,载玻片上加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜, PBS冲洗3x3分钟;
7、 除去PBS,载玻片上加检测试剂盒(按照试剂盒说明书进行操作), PBS冲洗3x3分钟;
8、 除去PBS,根据检测试剂盒选择相应的显色系统,最后中性树胶封固。

备注:更好的方法是通过离心或直接收集将细胞聚拢,再用蛋清或琼脂包裹后形成细胞块进行固定、脱水、包埋、切片,再按照免疫组化染色步骤进行操作。